@MASTERSTHESIS{ 2019:140397445, title = {Efeito da fotobiomodulação sobre células musculares cultivadas com meio condicionado de macrófagos ativados para perfil M1}, year = {2019}, url = "http://bibliotecatede.uninove.br/handle/tede/2694", abstract = "Devido ao seu papel funcional, o músculo esquelético representa um dos órgãos mais lesionados do corpo. Contudo, este tecido possui alta capacidade adaptativa e regenerativa garantida pela presença das células satélites (CS) que, após a lesão, passam pelas fases de proliferação, diferenciação e fusão para recompor o musculo afetado. Os macrófagos desempenham papel crucial nesse processo, modulando por meio de seus produtos, as diferentes fases do reparo muscular. A fotobiomodulação (FBM) tem demonstrado, efeitos positivos sobre o reparo muscular atuando na migração e proliferação celular, assim como sobre a síntese de mediadores inflamatórios em diferentes linhagens celulares de macrófagos e de mioblastos. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos da FBM sobre a viabilidade, proliferação e diferenciação e síntese de óxido nítrico (NO), IL-6 e TNF-α de células satélites musculares (C2C12) indiferenciadas e induzidas a diferenciação quando cultivadas na presença do meio condicionado de macrófagos J774, ativados para perfil M1 (LPS e IFN-Ɣ) e irradiados com os mesmos parâmetros dosimétricos. Foram avaliados as seguintes situações experimentais: (A) mioblastos C2C12 em meio de proliferação (10% de soro fetal bovino - SFB): (1) C2C12 NI (não-irradiada) + meio de proliferação, (2) C2C12 NI + meio condicionado de macrófagos (MM) não ativado, (3) C2C12 NI + M1 MM não-irradiado, (4) C2C12-FBM + M1 MM não-irradiado, (5) C2C12 NI + M1 MM irradiado, (6) C2C12- FBM + M1 MM irradiado; e (B) mioblastos C2C12 induzidas a diferenciação (2% soro de cavalo - SC): (7) C2C12 NI + meio de diferenciação, (8) C2C12 NI + MM não ativado, (9) C2C12 NI + M1 MM não-irradiado, (10) C2C12-FBM + M1 MM não-irradiado, (11) C2C12 NI + M1 MM irradiado, (12) C2C12- FBM + M1 MM irradiado. As irradiações foram realizadas utilizando laser Arseneto de Gálio Alumínio (780 nm, 70 mW, 17,5 J/cm2, 1 J). Os mioblastos C2C12 indiferenciados (10% SFB) e induzidos a diferenciação (2% SC - 72h) foram irradiados, plaqueados e receberam o meio condicionado de macrófagos nas concentrações finais de 30 e 50% (v/v) e foram incubados em 370C, 5% CO2 por 24 e 48h. Foram avaliados a viabilidade, proliferação celular e a síntese de NO através a técnica de MTT, Cristal Violeta e Griess, respectivamente, a síntese de IL-6 e TNF-α foi avaliada pela técnica de ELISA. A diferenciação dos mioblastos foi avaliada por meio da contagem de núcleos e índice de fusão usando os corantes May Grunwald e Giemsa. Foram realizados três experimentos independentes. Todos os resultados foram submetidos a análise estatística. Os resultados demonstraram que o tratamento com FBM pode gerar efeitos positivos no que se refere ao aumento da viabilidade e proliferação de CS na fase proliferativa após 48h cultivadas em maior concentração (50%) de meio condicionado M1 irradiado e aumento da viabilidade de CS em fase de diferenciação após 48h cultivadas em diferentes concentrações e aumento da proliferação (48h) cultivado em menor concentração (30%) de meio condicionado de macrófagos M1 irradiados. Promoveu redução de NO em CS irradiadas em suas diferentes fases em diferentes concentrações de meio condicionado de macrófagos M1 irradiados após 24 e 48h. Redução da síntese das citocinas pró-inflamatórias em ambas concentrações de meio condicionado de macrófagos M1 irradiado, como: redução IL-6 em CS irradiadas em fase de proliferação após 24 e 48h de cultivo e redução da síntese de TNF-α após 48h em CS irradiadas nas fases de proliferação e diferenciação. E no favorecimento do processo de diferenciação (índice de fusão) de CS indiferenciadas e irradiadas (24 e 48h) e diferenciadas e irradiadas (48h) cultivadas em diferentes concentrações de meio condicionado de macrófagos M1 também irradiados. Em conclusão, a FBM pode gerar efeitos positivos em células satélites musculares em suas diferentes fases, quando cultivadas em meio a diferentes concentrações de produtos de macrófagos de perfil pró-inflamatório (M1) também submetidos a irradiação nos mesmos parâmetros, no que se refere a redução da síntese de NO e citocinas inflamatórias e no favorecimento do processo de diferenciação das células satélites musculares (índice de fusão).", publisher = {Universidade Nove de Julho}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde}, note = {Saúde} }