@MASTERSTHESIS{ 2025:599511107, title = {Efeitos de formulações líquidas e em gel na terapia fotodinâmica: avaliação da atividade antimicrobiana e da biocompatibilidade celular}, year = {2025}, url = "http://bibliotecatede.uninove.br/handle/tede/3931", abstract = "Staphylococcus aureus é um patógeno Gram-positivo associado à infecções graves, e o aumento da resistência antimicrobiana destaca a aPDT como uma alternativa promissora devido à sua ação eficaz e à ausência de indução de resistência. O objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, um protocolo otimizado de aPDT para a descolonização de S. aureus, comparando azul de metileno em solução líquida (0,005% e 0,01%) e em gel (0,01%), sob diferentes tempos de pré-irradiação (3 e 5 min), além de investigar a citotoxicidade e a biocompatibilidade das formulações líquidas em fibroblastos L929. Para garantir a padronização da carga bacteriana utilizada nos ensaios, foi estabelecido o momento de maior atividade de crescimento da bactéria, assegurando reprodutibilidade experimental. Foram realizados experimentos para avaliar a atividade da aPDT em culturas planctônicas nos grupos organizados em: (i) controle, sem tratamento; (ii) laser, submetido apenas à irradiação; (iii) AM, incubado com 0,005% ou 0,01%, em formulação líquida ou em gel, com tempos de pré-irradiação de 3 ou 5 minutos; e (iv) aPDT, combinando AM (0,005% ou 0,01%, líquido ou gel) e laser, após pré-irradiação de 3 ou 5 minutos. As irradiações foram realizadas com um protótipo de laser (400 mW, 120 J por ponto, 660 nm). Após os tratamentos, as amostras foram diluídas, plaqueadas em ágar BHI e incubadas por 24 h para determinação de UFC/mL. A biocompatibilidade foi avaliada em fibroblastos murinos L929, nos mesmos grupos experimentais (exceto AM gel). As células foram tratadas e analisadas após 24 e 48 h, por meio dos ensaios MTT, Cristal Violeta e teste de Griess. Como resultado, a padronização da curva, na fase exponencial (mid- log) foi atingida em ≈ 5 h, com OD600 ≈ 0,7 (2 × 10⁸ UFC/mL). Tanto o laser isolado quanto o AM não promoveram redução de UFC/mL, enquanto a combinação laser + AM líquido, em ambas as concentrações, resultou em inativação parcial após 3 min de pré-irradiação, e total após 5 min. A formulação em gel de azul de metileno a 0,01% não promoveu redução do crescimento bacteriano, independentemente do tempo de pré-irradiação avaliado (3 ou 5 minutos). Nos fibroblastos L929, os grupos controle, laser isolado e AM isolado mantiveram morfologia, monocamada e viabilidade metabólica preservadas, enquanto os grupos submetidos à aPDT (laser + AM 0,005% e 0,01%) exibiram perda acentuada de células aderidas, baixa retenção de Cristal Violeta e redução da viabilidade no ensaio de MTT. As dosagens de nitrito (24 e 48 h) não mostraram aumento entre os grupos. Podemos concluir que a aPDT com AM líquido mostrou eficácia na inativação de S. aureus, especialmente após 5 minutos de pré-irradiação em ambas as concentrações, enquanto o gel apresentou desempenho limitado. Contudo, a combinação AM + laser apresentou citotoxicidade em fibroblastos murinos L929.", publisher = {Universidade Nove de Julho}, scholl = {Programa de Pós-Graduação em Medicina – Biofotônica}, note = {Saúde} }