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Tipo do documento: Dissertação
Título: Efeito da irradiação do laser de baixa potência na motilidade espermática, integridade da membrana plasmática e acrossomal em espermatozoides de bovinos criopreservados
Título(s) alternativo(s): Effect of low level laser irradiation on sperm motility and integrity of the plasma membrane ans acrossome in cryopreserved bovine sperm
Autor: Fernandes, Guilherme Henrique Cardoso 
Primeiro orientador: Carvalho, Regiane Albertini de
Primeiro coorientador: Serra, Andrey Jorge
Primeiro membro da banca: Carvalho, Regiane Albertini de
Segundo membro da banca: Costa, Marcília da Silva
Terceiro membro da banca: Marcos, Rodrigo Labat
Resumo: O congelamento de espermatozoides altera significativamente sua integridade. A criopreservação é um processo que envolve resfriamento, congelamento, descongelamento e todos estes contribuem para danos estruturais no espermatozoide, resultando na redução da capacidade de fertilização. A irradiação com laser de baixa potência (LBP) aumenta a oferta de energia para a célula e causa redução de espécies reativas de oxigênio (ROS), contribuindo para a restauração do consumo de oxigênio e síntese de adenosina trifosfato (ATP) na mitocôndria. O objetivo deste estudo foi analisar os efeitos da irradiação do LBP sobre a motilidade espermática, integridade da membrana plasmática e acrossomal em espermatozoides bovinos criopreservados. Foram analisadas 09 amostras de sêmen de touro (Bos taurus indicus), divididos em três grupos: um grupo controle sem irradiação laser, um grupo 4J submetido a uma dose de irradiação do laser de 4 joules, e um grupo 6J submetido a dose de 6 joules. As amostras foram analisadas quanto à viabilidade celular e a integridade da membrana acrossomal utilizando citometria de fluxo; outra parte foi para análise de movimento. A irradiação foi realizada em placas de Petri de 30 mm contendo 3 ml de sêmen por um gálio alumínio fosfeto de índio díodo laser com um comprimento de onda de 660 nm, 30 mW, e energia de 4 e 6 joules por 133 e 200 segundos, respectivamente. Na sequência da criopreservação as amostras de sêmen controle foram irradiadas e submetidas a análise por citometria de fluxo (7AAD e FITC-PSA) e análise de movimento utilizando o ISAS® - Sistema de Análise de sêmen integrado. Os resultados da citometria de fluxo demostrou um aumento na porcentagem de espermatozoides vivos e integridade acrossômica em relação ao controle de células quando submetidos à irradiação do LBP em duas doses diferentes de 4 e 6 joules (p <0,05). Na análise de movimento a retilinearidade e a motilidade total utilizando a dose de 4 joules foi mais eficaz (p <0,05). Conclui-se que a irradiação do LBP pode exercer efeitos benéficos na preservação de espermatozoides vivo. Uma dose de 4 joules antes de criopreservação foi mais eficaz do que uma dose de 6 joules em preservar a motilidade dos espermatozoides.
Abstract: Freezing changes sperm integrity remarkably. Cryopreservation involves cooling, freezing, and thawing and all these contribute to structural damage in sperm, resulting in reduced fertility potential. Low-level laser irradiation (LLLI) could increase energy supply to the cell and cause reactive oxygen species reduction (ROS), contributing to the restoration of oxygen consumption and adenosine triphosphate synthesis (ATP) in the mitochondria. Our goal was to analyze the effects of low-level laser irradiation on sperm motility and integrity of the plasma membrane and acrosome in cryopreserved cattle sperm. Materials and Methods: We analyzed 09 samples of bull semen (Bos taurus indicus), divided into three groups: a control group without laser irradiation, a 4J group subjected to a laser irradiation dose of 4 joules, and a 6J group subjected to dose of 6 joules. Samples were divided for the analysis of cell viability and acrosomal membrane integrity using flow cytometry; another portion was used for motion analysis. Irradiation was performed in petri dishes of 30 mm containing 3 ml of semen by an aluminum gallium indium phosphide laser diode with a wavelength of 660 nm, 30 mW power, and energy of 4 and 6 joules for 133 and 200 seconds respectively. Subsequently, the irradiated and control semen samples were subjected to cryopreservation and analyzed by flow cytometry (7AAD and FITC-PSA) using the ISAS® - Integrated Semen Analysis System. Results: Flow cytometry showed an increase in the percentage of live sperm cells and acrosome integrity in relation to control cells when subjected to irradiation of low-power laser in two different doses of 4 and 6 joules (p < 0.05). In the analysis of straightness, percentage of cell movement, and motility, a dose of 4 joules was more effective (p < 0.05) Conclusion: We conclude that LLLI may exert beneficial effects in the preservation of live sperm. A dose of 4 joules prior to cryopreservation was more effective than a dose of 6 joules in preserving sperm motility.
Palavras-chave: laser de baixa potência
espermatozoides
motilidade espermática
integridade acrossomal
low level laser irradiation
esperm
esperm motility
acrosame integrity
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Nove de Julho
Sigla da instituição: UNINOVE
Departamento: Saúde
Programa: Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde
Citação: Fernandes, Guilherme Henrique Cardoso. Efeito da irradiação do laser de baixa potência na motilidade espermática, integridade da membrana plasmática e acrossomal em espermatozoides de bovinos criopreservados. 2014. 64 f. Dissertação( Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde) - Universidade Nove de Julho, São Paulo.
Tipo de acesso: Acesso Restrito
URI: http://bibliotecadigital.uninove.br/handle/tede/1307
Data de defesa: 18-Dec-2014
Appears in Collections:Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde

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