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Tipo do documento: Dissertação
Título: Efeito da irradiação com LED vermelho (630nm) sobre ciclo celular, potencial elétrico mitocondrial e senescência de células-tronco da polpa de dentes
Título(s) alternativo(s): Effect of red LED (630 nm) irradiation on the cell cycle, mitochondrial electrical potential and senescence of stem cells from the pulp of human deciduous teeth
Autor: Vale, Kátia Llanos do 
Primeiro orientador: Fernandes, Kristianne Porta Santos
Primeiro membro da banca: Fernandes, Kristianne Porta Santos
Segundo membro da banca: Maria, Durvanei Augusto
Terceiro membro da banca: Ferrari, Raquel Agnelli Mesquita
Resumo: Diversos estudos tem avaliado a melhor maneira de preservar a autorenovação e a viabilidade de células- tronco (CT). A fototerapia tem demonstrado capacidade de modular a proliferação de CT coletadas de diferentes nichos do corpo humano, entretanto, ainda são escassos os relatos sobre os efeitos da irradiação com diodo emisssor de luz (LED) sobre as CT oriundas de dentes decíduos (CTDD). O objetivo deste estudo foi investigar o efeito do LED vermelho (630 nm, 37mW/cm2, 75 mW) em diferentes densidades de energia sobre o ciclo celular, potencial elétrico mitocondrial e senescência de CTDD. Culturas de CTDD previamente caracterizadas foram expandidas (até a sexta passagem) e irradiadas com LED nas densidades de energia de 2J/cm2; 4J/cm2; 8J/cm2; 16J/cm2 e 32J/cm2. Culturas não irradiadas serviram como controle. Após 24h em estufa de cultivo, foram conduzidos os ensaios, por citometria de fluxo, para avaliar o ciclo celular (utilizando Iodeto de Propídio) e o potencial elétrico mitocondrial (Rodamina-Rh123) das culturas de cada grupo experimental. Pela análise dos dados destes ensaios, foram escolhidas as duas densidades de energia que induziram melhor resposta proliferativa para análise da senescência (pela expressão enzimática da ß-Galactosidase). A avaliação do ciclo celular revelou que as culturas irradiadas com 2 J/cm2 e com 16 J/cm2 apresentaram maior porcentagem de células na fase de síntese (fase S) que as não irradiadas, porém só nas culturas irradiadas com 16 J/cm2 esta diferença foi significante (p<0.05). Não houve diferença nas comparações entre as culturas irradiadas e as não irradiadas nas demais fases do ciclo celular. Também não foi observada diferença no percentual de células com mitocôndrias viáveis (avaliadas pelo potencial elétrico mitocondrial) entre as culturas irradiadas e as culturas controle (não irradiadas). A avaliação do efeito do LED na senescência, realizado para as densidades de energias 2 J/cm2 e 16 J/cm2, também não evidenciou diferenças nas culturas não irradiadas e nas irradiadas. Pode-se concluir que a irradiação com LED de 630nm utilizado com irradiância de 37 mW/cm2, potência saída de 75 mW e densidade de energia de 16J/cm2 foi capaz de induzir resposta proliferativa em culturas de CTDD sem afetar sua função mitocondrial ou induzir a senescência.
Abstract: Studies have evaluated the best way to preserve the self-renewal and viability of stem cells. Phototherapy has demonstrated the capacity to modulate the proliferation of stem cells collected from different sites of the human body. However, there are few reports on the effects of light-emitting diode (LED) irradiation on deciduous teeth stem cell (SHED). The aim of the present study was to investigate the effect of red LED (630nm, 37mW/cm2 and 75mW) at different energy densities on the cell cycle, mitochondrial electrical potential and senescence of DTST. Previously characterized SHED cultures were expanded (through to the sixth passage) and irradiated with LED at energy densities of 2J/cm2, 4J/cm2, 8J/cm2, 16J/cm2 and 32J/cm2. Non-irradiated cultures served as control. After 24h of incubation, assays were conducted using flow cytometry to evaluate the cell cycle (using propidium iodide) and mitochondrial electrical potential (using rhodamine-123) of the cultures in each group. For the purposes of data analysis, the two energy densities that induced the best proliferative response were chosen for the analysis cell senescence (based on the enzyme expression of ß-galactosidase). Cultures irradiated with 2 J/cm2 and 16 J/cm2 had the higher percentages of cells in the synthesis phase in comparison to control cultures, but the difference was only significant in cells irradiated with 16 J/cm2 (p<0.05). No significant differences were found between irradiated and control cells regarding other cell cycle phases. Moreover, no significant differences were found regarding the percentage of cells with viable mitochondria (evaluated based on mitochondrial electrical potential) between irradiated and control cultures. With regard to cell senescence, no significant differences were found between control cultures and cultures irradiated with 2 J/cm2 or 16 J/cm2. LED irradiation at 630nm with irradiance of 37 mW/cm2, output power of 75 mW and energy density of 16J/cm2 was capable of inducing a proliferative response in deciduous tooth stem cells without affecting mitochondrial function or inducing senescence.
Palavras-chave: células-tronco
dente decíduo
LED
fototerapia
ciclo celular
senescência
stem cells
deciduous teeth
LED
phototherapy
cell cycle
senescence
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Nove de Julho
Sigla da instituição: UNINOVE
Departamento: Saúde
Programa: Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde
Citação: Vale, Kátia Llanos do. Efeito da irradiação com led vermelho (630nm) sobre ciclo celular, potencial elétrico mitocondrial e senescência de células-tronco da polpa de dentes. 2016. 88 f. Dissertação( Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde) - Universidade Nove de Julho, São Paulo.
Tipo de acesso: Acesso Restrito
URI: http://bibliotecatede.uninove.br/handle/tede/1771
Data de defesa: 29-Fev-2016
Aparece nas coleções:Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde

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