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Tipo do documento: Dissertação
Título: Efeito da terapia com laser de baixa potência (LBP) em modelo experimental de fibrose pulmonar idiopática (FPI)
Título(s) alternativo(s): Effect of low level laser therapy in a experimental model of idiopathic pulmonary fibrosis (IFP)
Autor: Silveira, Elaine Cristina da 
Primeiro orientador: Oliveira, Ana Paula Ligeiro de
Primeiro membro da banca: Oliveira, Ana Paula Ligeiro de
Segundo membro da banca: Dolhnikoff, Marisa
Terceiro membro da banca: Vieira, Rodolfo de Paula
Resumo: A fibrose pulmonar idiopática é uma das doenças intersticiais mais comuns, que ocasiona grande impacto na saúde da população acometida, possui fatores de riscos ambientais e genéticos, com um pobre prognóstico e sem tratamento efetivo disponível.Vários modelos experimentais têm sido propostos, objetivando o avanço no conhecimento dos processos fisiopatológicos da Fibrose pulmonar idiopática (FPI), assim como no descobrimento de novas opções terapêuticas. A terapia com Laser de Baixa Potência (LBP) é uma terapia relativamente nova e eficaz, de baixíssimo custo, sem efeitos colaterais e de possível utilização no tratamento das doenças pulmonares. Alguns estudos já relatam o efeito da terapia com LBP, como uma terapia eficaz principalmente em doenças pulmonares, pois diminui as citocinas inflamatórias e aumenta as citocinas antinflamatórias vindo a ser pertinente como base para estudo terapêutico desta doença.Assim, no presente estudo avaliamos os efeitos do LBP sobre as células inflamatórias e estruturais dos pulmões em um modelo de fibrose pulmonar induzida por bleomicina. Foram utilizados dezoito camundongos C57Bl/6 machos com aproximadamente 20g, divididos em 3 grupos experimentais: Basal (n=5), Fibrose (n=6) e fibrose + Laser (n=7). Os animais foram anestesiados com quetamina e xilazina e receberam o sulfato de bleomicina (1,5U/Kg por via orotraqueal) administrada uma única vez. Após 14 dias os animais receberam a terapia com laser por 7 dias (1 x/dia). Vinte e quatro horas após a irradiação com laser, os animais foram anestesiados com quetamina e xilazina e traqueostomizados para a realização do lavado broncoalveolar (LBA).O número total de células foram avaliados em câmara de Neubauer, seguida pela preparação das lâminas em citocentrifuga as quais foram coradas com DiffQuick e contadas 300 células por lâmina. Após a realização do LBA, os pulmões foram removidos em bloco e fixados em solução de formalina 10% durante 24 horas e em seguida, submetidos à análise histológica. Adicionalmente, três animais foram utilizados para cultura primária de pneumócitos tipo ll, células epiteliais e de fibroblastos, onde foram estimuladas com bleomicina, irradiadas ou não com laser. Foram quantificados nos sobrenadantes das células celulares e no do LBA os níveis de IL-1β,IL6, TNF-α,TGF-β, IL-10,IL-17, INF, 1/kC utilizando kits de ELISA. Nossos resultados indicam que a terapia com LBP reduziu a inflamação pulmonar, demonstrado pela contagem total e diferencial de células do lavadobroncoalveolar (LBA) bem como os níveis de citocinas/quimiocinas (IL-1β, IL-6, IL-10, IFN-, TNF- e KC).Ainda, observamos redução de alguns mediadores inflamatórios no sobrenadante de culturas de fibroblastos e de pneumócitos II após a laserterapia.
Abstract: Pulmonary idiopathic fibrosis is one of the most usual intersticial diseases with great impact on life quality of patients. With both environmental and genetic factors involved, it has poor prognosis and unfortunately no effective treatment. Several experimental models have been proposed with the aim to better understand the mechanisms involved, and also for the stablishment of an effective therapy. Low level laser therapy is relatively new but may be considered a promising approach for chronic inflammatory diseases, with very low cost and no adverse effects. Some researches have already demonstrated the efficacy of such therapy on lung diseases, whose inflammatory parameters were reduced, mainly due to na increase in anti-inflammatory citokines. Thus, at the presente research we evaluated the effect of low level laser irradiation on both inflammatory and structural cells of the lung after bleomycin-induced lung fibrosis. For that, eighteen male C57Bl/6 mice were separated in three groups: Basal (n=5), Fibrosis (n=6) and fibrosis + Laser (n=7). Animals were anesthetized with ketamina and xilazina and received one dosis of bleomycin at 1,5U/Kg by orotraqueal. Fourteen days later, experimental groups received laser irradiation for seven days oce a day. Twenty-four hours later, all animaiswere euthanized and bronchoalveolar lavage fluid was obtained. Total cells were counted on Neubauer chambers and followed by cytospin staining with DiffQuick. Three hundred cells were counted per slide. Further, pulmonary tissue was fixed in formaline 10% for twenty-four hours and included in paraffin and submitted to H&E staining for histopathological analysis. Culture of type II pneumocytes, epithelial cells and fibroblasts were also obtained and, after treatment with bleomycin, cells were irradiated or not wthlow level laser. Several citokines were evaluated, as IL-1β,IL6, TNF-α,TGF-β, IL-10,IL-17, INF, 1/kC by ELISA. Our results demonstrate that laser irradiation significantly reduces lung inflammation, evidenced by reduced celullar infiltrate in the lavage, as well as for the reduction in of IL-1β, IL-6, IL-10, IFN- g, TNF-a and KC. Thus, our findings corroborate the idea of low level laser as beneficial for the treatment of lung interstitial diseases.
Palavras-chave: fibrose pulmonar idiopática
laser de baixa potencia
bleomicina
inflamação pulmonar
citocinas
células estruturais pulmonares
idiopathic lung fibrosis
low level laser
bleomycin
lung inflammation
structural pulmonar cells
Área(s) do CNPq: CIENCIAS DA SAUDE
Idioma: por
País: Brasil
Instituição: Universidade Nove de Julho
Sigla da instituição: UNINOVE
Departamento: Saúde
Programa: Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde
Citação: Silveira, Elaine Cristina da. Efeito da terapia com laser de baixa potência (LBP) em modelo experimental de fibrose pulmonar idiopática (FPI). 2014. 99 f. Dissertação( Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde) - Universidade Nove de Julho, São Paulo.
Tipo de acesso: Acesso Restrito
URI: http://bibliotecatede.uninove.br/handle/tede/1308
Data de defesa: 18-Dez-2014
Aparece nas coleções:Programa de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da Saúde

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